無(wú)菌室內(nèi)應(yīng)備有工作濃度的常用消毒液,如苯酚酸(堿)溶液,75%的酒精,0.1%的新潔爾滅溶液等等。無(wú)菌室的位置一般要求建在人員流動(dòng)較少的地方,距離普通的辦公環(huán)境或者微生物準(zhǔn)備室要有一定的距離。無(wú)菌室內(nèi)必須配備相應(yīng)的緩沖工作間用于擺放專用白大褂或?qū)S靡旅钡取?br />
無(wú)菌室中的物流窗應(yīng)避免與空氣產(chǎn)生直接對(duì)流,最好不要正對(duì)著無(wú)菌室大門;空調(diào)需有可靠的多重高效過(guò)濾除菌系統(tǒng);所有照明和紫外燈電源總開(kāi)關(guān)應(yīng)設(shè)置于無(wú)菌室門口或門外。無(wú)菌室整個(gè)布局設(shè)計(jì)應(yīng)按照人、物分離原則,防止交叉污染。
此外,在人員通道可配備高效風(fēng)淋室以減少實(shí)驗(yàn)人員帶入的污染。對(duì)無(wú)菌室和其內(nèi)部的超凈工作臺(tái)、生物安全柜都必須進(jìn)行定期監(jiān)測(cè)和日常維護(hù),并有監(jiān)測(cè)和維護(hù)記錄。日常維護(hù)主要包括紫外線燈擦拭、濾網(wǎng)擦洗更換、空氣消毒及全面清潔衛(wèi)生等川。
無(wú)菌室的建材使用控制
用于無(wú)菌室建設(shè)的所有材料均應(yīng)符合消防和環(huán)保要求,具有耐腐蝕和易清潔的特點(diǎn)。無(wú)菌室的內(nèi)部裝修應(yīng)整齊、光滑、避免凹凸、所有角落最好設(shè)置為球弧體狀以避免灰塵長(zhǎng)期堆積難以清掃和消毒。
無(wú)菌室的各個(gè)通道進(jìn)出口應(yīng)采用門縫緊密且打開(kāi)后能自動(dòng)閉合的推拉式門,墻壁及吊頂應(yīng)采用隔熱防火、耐化學(xué)腐蝕、耐水分滲透、隔音且易清潔的新型建材以防止塵垢堆積、材料脫落、滋生霉菌、不易清潔等情況的發(fā)生。
總體上,無(wú)菌室應(yīng)盡量設(shè)計(jì)成完全封閉的模式,一般僅靠高效過(guò)濾系統(tǒng)與外界進(jìn)行空氣交換。當(dāng)前空氣潔凈技術(shù)已經(jīng)發(fā)展得比較成熟,在很多學(xué)科領(lǐng)域都得到了廣泛的應(yīng)用,目前很多食品微生物檢測(cè)用的無(wú)菌室也都已采用比較先進(jìn)和方便易用的的層流凈化系統(tǒng)裝置,基本上都能保證食品微生物學(xué)檢驗(yàn)過(guò)程中無(wú)菌狀態(tài)、恒溫恒濕、穩(wěn)定風(fēng)速風(fēng)量和空氣潔凈度的要求。
無(wú)菌室環(huán)境及凈化控制
無(wú)菌室無(wú)菌環(huán)境的質(zhì)量控制是微生物檢驗(yàn)獲得準(zhǔn)確數(shù)據(jù)極為重要的環(huán)節(jié)。食品微生物學(xué)檢驗(yàn)對(duì)無(wú)菌的環(huán)境和無(wú)菌操作的要求非常嚴(yán)格,整個(gè)檢測(cè)過(guò)程始終要求在無(wú)菌狀態(tài)下以無(wú)菌操作方式進(jìn)行,所以對(duì)無(wú)菌狀態(tài)的質(zhì)量控制是微生物檢驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確可靠的保證。操作人員要嚴(yán)格定期對(duì)無(wú)菌室消毒效果進(jìn)行評(píng)價(jià),同時(shí)要制定合理的環(huán)境監(jiān)測(cè)程序,對(duì)環(huán)境監(jiān)測(cè)結(jié)果進(jìn)行數(shù)據(jù)分析,嚴(yán)格按照相應(yīng)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)設(shè)定的不同工作區(qū)域可接受的菌落數(shù)量,對(duì)出現(xiàn)超標(biāo)情況的處理要進(jìn)行文件化控制。
此外,無(wú)菌室內(nèi)的環(huán)境情況例如溫度和濕度等可能會(huì)影響無(wú)菌室內(nèi)的消毒滅菌效果,通常情況下溫度應(yīng)控制在22℃左右,相對(duì)濕度不超過(guò)65%會(huì)比較適宜。整個(gè)無(wú)菌室應(yīng)采用先進(jìn)高效層流空氣凈化系統(tǒng)以保證恒溫、恒濕、換氣量和空氣潔凈度的相關(guān)要求??諝鈨艋到y(tǒng)中的高效過(guò)濾膜能對(duì)空氣中不同大小規(guī)格的塵埃粒子進(jìn)行有效過(guò)濾,防止附著在塵埃粒子上的微生物污染無(wú)菌室;采用從頂部送風(fēng)、下側(cè)回風(fēng)的氣流組織方式既保證了潔凈度,又節(jié)約了能源。
同時(shí)高效空氣過(guò)濾系統(tǒng)通風(fēng)量能滿足人員的需要,較好解決傳統(tǒng)無(wú)菌室不能置換新鮮潔凈空氣、工作環(huán)境差等問(wèn)題。
此外,應(yīng)定期對(duì)無(wú)菌室的無(wú)菌程度進(jìn)行監(jiān)測(cè),可參考醫(yī)藥工業(yè)潔凈室相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)對(duì)于塵埃粒子、沉降菌、浮游菌等項(xiàng)目的限量對(duì)食品微生物無(wú)菌室進(jìn)行定期測(cè)試。沉降菌法有最簡(jiǎn)單、最直觀,也最能真實(shí)地反映物體表面(特別是控制部位)自然污染程度的特點(diǎn),故也可采用平板計(jì)數(shù)瓊脂和孟加拉紅瓊脂平板各3塊,等距離置于無(wú)菌室工作位置的一條對(duì)角線上,開(kāi)蓋暴露15min,分別在36℃培養(yǎng)48h,28℃培養(yǎng)5d后計(jì)數(shù)沉降的細(xì)菌和霉菌及酵母的菌落數(shù),若平均菌落數(shù)超過(guò)3CFU/皿,則應(yīng)當(dāng)對(duì)無(wú)菌室空氣和無(wú)菌室內(nèi)的物體表面進(jìn)行消毒以改善其無(wú)菌環(huán)境。